細胞/組織裂解液

規(guī)格1：20ml      價格1：￥320

規(guī)格2：50ml      價格2：￥680

規(guī)格3：100ml    價格3：￥1320

SKU: RC0005Category: 細胞裂解液Tags: Cell Culture

產(chǎn)品概述

從細胞或組織中提取到完整的蛋白質(zhì)樣品是影響免疫印跡分析（Western blotting，WB）得到真實可靠結(jié)果的關鍵因素之一。在實際操作中，從細胞膜、細胞質(zhì)、細胞器及細胞核中提取蛋白質(zhì)通常采用去污劑緩沖液（如 RIPA 緩沖液）和/或物理破碎（如超聲處理）的方法；尤其是含有 0.1% SDS 的RIPA 緩沖液或其替代品（如不含 SDS 的 NP-40 緩沖液）已作為一種標準方法被廣泛用于哺乳動物細胞和組織的裂解。事實上，RIPA 可以有效溶解和提取分子量小于 90 kDa 的中、小分子的絕大部分的蛋白質(zhì)，但其對于分子量大于 90 kDa 的大分子蛋白質(zhì)功效不大。為了更有效地提取到大分子蛋白，許多實驗室會將 RIPA 緩沖液和超聲處理結(jié)合使用，通過超聲打斷 DNA，從而降低裂解液的粘稠度。然而，超聲處理會破壞大分子蛋白。此外，為了保證蛋白質(zhì)在提取的過程中不被細胞本身的蛋白酶降解和蛋白酶去修飾，各種蛋白酶抑制劑和特異的酶抑制劑要加到RIPA 緩沖液中。例如，為了減少蛋白質(zhì)的降解，需要將蛋白酶抑制劑如 PMSF 添加到 RIPA 緩沖液中；同樣，為了抑制磷酸酶活性，需加入氟化鈉和正釩酸鈉。即便如此，翻譯后修飾的蛋白信號還是不能得到有效的保護。

本試劑盒產(chǎn)品解決了以上問題和缺陷。它可以快速完整的提取細胞和組織中蛋白質(zhì)，并有效保護蛋白質(zhì)的化學修飾，可以取代現(xiàn)有的 RIPA 及其衍生的緩沖液，具有通用性好、應用廣泛、實用高效等優(yōu)點，同時，該裂解試劑盒在提取蛋白質(zhì)時無需額外添加蛋白酶、 磷酸酶以及其它酶抑制劑，無需超聲波處理，不僅可以完整提取分子量大于 90kDa 的大分子蛋白質(zhì)， 而且對小于 90kDa 的蛋白質(zhì)分子應用同樣有效，大大簡化了實驗流程，節(jié)約時間和材料成本，從而在源頭上為下游的蛋白質(zhì)分析提供了優(yōu)質(zhì)完整的蛋白質(zhì)樣品。

產(chǎn)品組分

產(chǎn)品特性

1.無需添加蛋白酶或其他酶抑制劑或超聲處理。

2.只需混合試劑 A 和 B；提取過程僅需 15 分鐘。

3.接近完整地抽提大分子蛋白質(zhì)；無超聲處理，避免蛋白質(zhì)片段化。

4.保護蛋白質(zhì)翻譯后修飾（如磷酸化、糖基化、泛素化、甲基化和乙酰化）無損失。

5.適用于哺乳動物細胞和組織的提取。

產(chǎn)品儲存

試劑 A 存放于-20°C 冷凍條件，試劑 B 存放于室溫或 4°C 冷藏條件。

注：若試劑 B 在 4°C 下長時間保存，可能會出現(xiàn)沉淀，這不影響產(chǎn)品質(zhì)量。當移至室溫下，沉淀會重新溶解。

產(chǎn)品應用

變性蛋白的提取；免疫印跡分析